免疫反應(yīng)抗體與抗原結(jié)合:在CLIA中,特異性抗體(通常是標(biāo)記有酶的抗體)與待測(cè)樣本中的抗原(即目標(biāo)分析物)結(jié)合。這種結(jié)合是高度特異性的,因?yàn)榭贵w是針對(duì)特定抗原設(shè)計(jì)的。形成抗原-抗體復(fù)合物:一旦抗體與抗原結(jié)合,就形成了抗原-抗體復(fù)合物。這個(gè)復(fù)合物是后續(xù)化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的基礎(chǔ)。化學(xué)發(fā)光反應(yīng)酶促反應(yīng):標(biāo)記在抗體上的酶(如堿性磷酸酶或辣根過(guò)氧化物酶)與特定的底物反應(yīng)。這個(gè)反應(yīng)通常需要特定的條件,如溫度、pH值等。發(fā)光物質(zhì)的生成:在酶的作用下,底物被轉(zhuǎn)化為能夠發(fā)光的物質(zhì)。這個(gè)過(guò)程涉及到化學(xué)能的釋放,轉(zhuǎn)化為光能。光信號(hào)的產(chǎn)生:當(dāng)發(fā)光物質(zhì)分解時(shí),會(huì)釋放出光子,產(chǎn)生可見(jiàn)光或近可見(jiàn)光。這個(gè)光信號(hào)的強(qiáng)度與樣本中抗原的濃度成正比。光信號(hào)的檢測(cè):化學(xué)發(fā)光產(chǎn)生的光信號(hào)被檢測(cè)系統(tǒng)(如光電倍增管或光電二極管)捕捉并轉(zhuǎn)換為電信號(hào)。數(shù)據(jù)分析:通過(guò)比較樣本產(chǎn)生的光信號(hào)與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品產(chǎn)生的光信號(hào),可以計(jì)算出樣本中抗原的濃度。這個(gè)過(guò)程通常由計(jì)算機(jī)軟件自動(dòng)完成。
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