準(zhǔn)備工作:**先,需要準(zhǔn)備好分選所需的細(xì)胞樣本。樣本可以是細(xì)胞懸液、組織細(xì)胞懸液或血液等,根據(jù)實驗設(shè)計選擇合適的樣本和預(yù)處理方法。確保樣本的質(zhì)量和純度對于分選結(jié)果的準(zhǔn)確性**關(guān)重要。儀器設(shè)置:根據(jù)實驗要求,進(jìn)行細(xì)胞分選儀的儀器設(shè)置。這包括設(shè)置流體流速、光源燈、激光器、熒光探測器等。根據(jù)目標(biāo)細(xì)胞類型,確定要檢測和分選的熒光標(biāo)記和參數(shù)設(shè)置。調(diào)整儀器和校準(zhǔn):需要對儀器進(jìn)行調(diào)整和校準(zhǔn),以確保精確的細(xì)胞分選。這包括流量校準(zhǔn)、熒光參數(shù)校準(zhǔn)、檢測器靈敏度等的調(diào)整。校準(zhǔn)確保流式細(xì)胞儀可以準(zhǔn)確地識別和分選目標(biāo)細(xì)胞。樣本加載與分選:將樣本裝載到細(xì)胞分選儀的樣本室中。根據(jù)實驗要求和目標(biāo)細(xì)胞類型,設(shè)置篩選門和排序參數(shù)。啟動儀器后,樣本開始通過流式細(xì)胞儀的流道,通過熒光激發(fā)和檢測系統(tǒng),根據(jù)預(yù)設(shè)的參數(shù)進(jìn)行細(xì)胞分選。數(shù)據(jù)獲取與分析:細(xì)胞分選儀會同時提供分選和檢測的數(shù)據(jù)。獲取后續(xù)分析所需的數(shù)據(jù)(如細(xì)胞計數(shù)、分布等),以及用于后續(xù)實驗的已分選細(xì)胞。清洗和維護(hù):在完成細(xì)胞分選后,對細(xì)胞分選儀進(jìn)行清洗和維護(hù)工作,以確保設(shè)備的正常運(yùn)行和準(zhǔn)確性。
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